学海无涯临床微生物第二十七章病毒感染
2017-8-23 来源：不详 浏览次数：次●考点 病毒的生物学性状 病毒的实验室检查方法 常见病毒的感染
第一节 概述
一类非细胞型微生物，个体极小，可通过细菌滤器，需用电子显微镜观察。 仅含一种核酸作为遗传物质，外被蛋白质衣壳或还有包膜。 病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。 在临床微生物感染中，近75%的传染病是由病毒引起的。 一、病毒的基本性状 （一）形态结构 1.大小和形状： 大小：测量单位用纳米表示，一般在20-nm之间。 形态大致可分为：球形或近似球形、杆状、弹形、砖形、蝌蚪形等。
异常增殖： 顿挫感染：病毒进入细胞后的环境不利于它的复制，不能合成本身的成分或不能组装和释放有感染性的病毒颗粒。 缺陷病毒：由于病毒基因组不完整或基因位点改变而不能进行正常增殖的病毒。 干扰现象：当两种不同的病毒或两株性质不同的同种病毒，同时或先后感染同一细胞或机体时，可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象。 （三）噬菌体 以细菌、真菌等为宿主，能引起细菌等裂解的病毒。 噬菌体特异性识别细菌表面受体，可用于进行细菌的鉴定与分型。
二、病毒的分类与命名 科、属、种3级或科、亚科、属、种4级。 DNA病毒、RNA病毒、DNA和RNA逆转录病毒三大类。 按传播途径可分为呼吸道病毒、胃肠炎病毒、经性传播感染的病毒等。 按感染部位与症状特征可分为肝炎病毒、出血性热病毒、疱疹病毒等。
第二节 病毒感染的实验诊断
病毒学实验室诊断有三个方面： ①直接检测和分离鉴定； ②检测病毒蛋白抗原成分和核酸； ③检测抗体。 一、标本采集、运送及处理 （一）标本采集 1.采样时机：应在病人急性期或发病初期采集标本。 2.标本种类： 根据不同病毒感染采集不同标本，如鼻咽分泌物、脑脊液、血液、粪便等。 （二）标本的运送及保存 快速传递，立即处理和接种。 采集和运送过程注意冷藏。如不能立即处理和接种，可在4℃保存数小时，长时间保存需置-70℃。 （三）标本处理 凝固的血液需先离心，得到的血清可以用于病毒分离。 肝素抗凝全血、脑脊液、胸腔液、水痘液以及尿液均可直接用于病毒分离培养。 有些标本如粪便等,常需粗提、提纯和浓缩等复杂处理过程。
三、病毒感染的诊断 （一）显微镜检查 1.用光学显微镜直接检查病毒包涵体。可作为病毒感染的辅助诊断，不是特异性试验。 核内包涵体：常见DNA病毒。如巨细胞病毒、单纯疱疹病毒、水痘-带状疱疹病毒和腺病毒等。 胞浆内包涵体：常见RNA病毒。如呼吸道合胞病毒、狂犬病病毒和痘类病毒等。 胞质内和胞核内包涵体：麻疹病毒等。 2.用电子显微镜直接检查病毒颗粒。 数小时即可从病毒形态上作出明确的鉴别诊断。 应用免疫电镜灵敏度更高。 （二）病毒抗原检查 利用特异性免疫血清检测标本中的病毒抗原。 常用方法有：免疫荧光技术、酶免疫技术、放射免疫法、反相间接血凝和对流免疫电泳等方法。 对于一些血清型别不多或在一般细胞培养系统中尚不能成功增殖的病毒，直接检测病毒抗原是快速而实用的方法。 （三）病毒抗体检查 利用特异性抗原检测病毒感染者血清中的IgM和IgG抗体。 常用的方法有中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验及免疫扩散等，还可以利用放射免疫法及酶联免疫吸附法。 IgM抗体出现在病毒感染的早期，所以标本采集时间对检测结果的影响很大。 IgG抗体检测需采集感染急性期与恢复期双份血清，恢复期IgG效价必须比急性期增高4倍或4倍以上时，才有诊断意义。 （四）病毒核酸检测 利用核酸杂交和PCR技术检测病毒特异基因片段。 检出病毒核酸并不等于检出具有传染性的病毒颗粒。
第三节 各类病毒感染的简介
一、呼吸道病毒 六、疱疹病毒 二、肠道病毒 七、肝炎病毒 三、急性胃肠炎病毒 八、反转录病毒 四、黄病毒 九、狂犬病病毒 五、出血热病毒 十、人乳头瘤病毒 一、呼吸道病毒 （一）流行性感冒病毒 （二）呼吸道合胞病毒 （三）麻疹病毒 （四）风疹病毒
（2）分型与变异 1）分型：根据核蛋白抗原和M蛋白的不同，将流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）型； 甲型流感病毒根据NA和HA的抗原性不同又分为若干亚型。 2）变异：变异的物质基础是HA和NA。 抗原变异幅度小时称为抗原漂移； 变异幅度大形成新的亚型，引起大规模流行，为抗原转变。 （3）培养特性： 常用鸡胚接种培养，初次分离接种羊膜腔为最佳，传代适应后可移种尿囊腔。 细胞培养一般用原代猴肾细胞（PMK）或犬肾传代细胞（MDCK）。 利用红细胞凝集试验确定病毒的存在。 （4）抵抗力： 不耐热，对干燥、日光、紫外线以及甲醛、乙醇等均敏感。 2.微生物检验 （1）标本采集和处理： 在发病急性期，以前3天为最好。 采集鼻腔洗液、咽拭子、鼻拭子等，置于Hanks液中。 放入冰壶中，速送实验室。若48小时内未能进行接种，标本应放于低温中保存。 （2）分离培养与鉴定： 标本接种于鸡胚羊膜腔，35℃3天后，收集羊水和尿囊液进行血凝试验并测定滴度。 血凝阳性者，用已知抗体作血凝抑制试验进行鉴定。若血凝阴性时，需用鸡胚盲传1～2次，仍不出现血凝阳性者，方可判断病毒分离阴性。 也可接种原代猴肾细胞（PMK）或犬肾传代细胞（MDCK）。 （3）快速诊断 1）免疫荧光技术和酶免疫技术。 2）分子杂交技术。 3）PCR技术。 4）免疫电镜技术。 （4）血清学诊断： 需同时检测急性期（5天以内）和恢复期（2～4周）血清，在相同条件下进行血凝抑制试验，如恢复期抗体效价比急性期高4倍或4倍以上即有诊断意义。 3.临床意义 病毒随飞沫传播进入易感者呼吸道，依靠血凝素与黏膜柱状上皮细胞相应受体结合，感染细胞。 主要在呼吸道柱状上皮细胞内复制增殖，很少入血，但代谢毒素样物质可进入血流引起发热、头痛和全身酸痛。 甲型流感可以是散发，也可以是全球性大流行。乙型流感的播散速度及范围不如甲型。 （二）呼吸道合胞病毒 1.生物学性状： 属副粘病毒科、肺病毒亚科、肺病毒属。 球形，具有多形性。 核酸为单负股RNA，不分节段。 包膜上有两种刺突： G蛋白作用于类似于流感病毒的血凝素蛋白HA； F蛋白是融合蛋白，介导病毒穿入和细胞融合。 2.微生物学检查 （1）标本采集和处理：可采用鼻腔洗液或鼻咽拭子，置转运培养基中冷藏（4℃）运送至实验室，尽可能立即接种。 （2）分离培养与鉴定： 不能在鸡胚中增殖，可在人类上皮细胞传代细胞系内增殖。 培养后3～7天，细胞病变为合胞体形成即细胞融合成多核巨细胞，胞质内形成嗜酸性包涵体。 （3）直接检测病毒抗原：可利用免疫荧光技术和酶免疫技术。 （4）血清学诊断： 常用中和试验、免疫荧光试验和酶免疫试验检查血清中IgG、IgM及IgA。 中和试验需双份血清，检测IgG滴度变化。检测患者IgM、IgA可进行早期诊断。 3.临床意义： 最常见的传播途径是经飞沫传染。 引起婴幼儿下呼吸道疾病的最常见的病毒。 最易引起婴幼儿细支气管炎和细支气管肺炎，若不及时处理，死亡率较高；较大儿童和成人主要引起上呼吸道感染。 （三）麻疹病毒 1.生物学性状： 属副粘病毒科、麻疹病毒属。 球形，核心为单负链RNA，三种衣壳蛋白（L、P、N），外被包膜，包膜内面为M蛋白，包膜表面有血凝素（H蛋白）和融合蛋白（F）。 H蛋白与细胞表面病毒受体CD46结合，感染宿主。 病毒抵抗力不强，对阳光和一般消毒剂敏感。 2.微生物学检查 （1）标本采集：在病人急性期内采集标本，如鼻咽拭子、鼻咽吸取物、痰等。 （2）直接检测病毒： 感染细胞产生细胞融合和多核巨细胞，胞质和胞核内有嗜酸性包涵体。 电镜或免疫电镜检查病毒颗粒。 免疫荧光技术及酶免疫技术，如EIA进行病毒抗原检测。 PCR技术或核酸探针进行鉴定。 （3）病毒分离： 接种传代细胞系HeLa、Vero以及原代人胚肾细胞等。 镜下观察是否有细胞病变出现。 （4）血清学诊断： 双份血清作补体结合试验，酶免疫测定及血凝抑制试验等。 用ELISA法检测血清特异性IgM可协助诊断。 3.临床意义： 麻疹是儿童时期最常见的急性呼吸道传染病。 通过飞沫直接传播，冬春季易发。 侵入上呼吸道和眼结膜上皮细胞内增殖，通过局部淋巴组织入血，出现第一次病毒血症，病毒随血流侵入全身淋巴组织和单核吞噬细胞系统增殖，再次入血形成第二次病毒血症，并感染眼结膜、皮肤、口腔黏膜、呼吸道、消化道、血管。 远期并发症是亚急性硬化性全脑炎（SSPE）。 （四）风疹病毒 1.生物学性状： 球形，核心为单正链RNA，外被包膜，包膜表面有血凝素。 能在绿猴肾、兔肾和人胚肾细胞内增殖。 抵抗力不强，不耐热，对脂溶剂敏感，紫外线能灭活病毒。 2.微生物学检查 （1）标本采集：在早期采集标本，如咽拭子、皮疹液、尿液以及死亡婴儿的各种脏器等。 （2）直接检测病毒：利用PCR技术或核酸探针进行鉴定。 （3）病毒分离与鉴定：接种非洲绿猴肾Vero以及原代人胚肾细胞等。镜下观察是否有细胞病变出现。用酶标或荧光素标记的单克隆抗体进行病毒鉴定。 （4）血清学诊断： 双份血清作血凝抑制试验等。用ELISA法检测血清特异性IgM可协助诊断。 患儿出生时血清中有抗风疹病毒IgM抗体和从母体获得的IgG抗体，或宫内羊水中有IgM抗体可判定为先天性风疹综合征。 3.临床意义： 风疹是儿童时期常见的传染病。风疹是全身麻疹样出疹伴耳后及枕下淋巴结肿大为特征的急性呼吸道传染病。 病毒在局部淋巴结增殖后，通过病毒血症播撒全身。大多数情况下，属于一过性和无明显临床症状的感染。 孕妇在妊娠早期感染病毒，经胎盘垂直传播感染胎儿，可引起先天性风疹综合征。胎儿出生后患先天性心脏病、耳聋、失明、智力障碍等。 二、肠道病毒 肠道病毒属小RNA病毒科肠道病毒属。 由粪-口途径传播。 主要包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒和一些新肠道病毒。 （一）生物学性状 无包膜，由简单的病毒衣壳和单股正链RNA组成。 能在猴肾、人胚肾、人羊膜细胞、HEP-2、HeLa细胞中增殖。 对外界抵抗力较强，在污水及粪便中可生存数月。对酸及乙醚稳定，对紫外线、干燥及热敏感，56℃30分钟可灭活。 （二）微生物学检查 1.标本的采集与处理： 合理采集相应标本，如脑脊液、血液、尿液、直肠拭子、咽喉拭子、鼻腔洗液等，将液体标本置无菌试管内立即送检。 2.直接检测病毒： 电镜检查及酶免疫法均可直接检测肠道病毒。 PCR在肠道病毒检测方面更具优势。 3.病毒分离： 猴细胞系对脊髓灰质炎病毒，B组柯萨奇病毒和ECH0病毒具有良好的敏感性。人类二倍体成纤维细胞适合于A组柯萨奇病毒的分离。 4.病毒鉴定： 中和试验进行病毒鉴定，此为鉴定的标准方法。 PCR及免疫荧光法进行快速鉴定。 5.血清学诊断： 常用方法有中和试验、补体结合试验、及血凝抑制试验。 三种试验只有中和试验较特异，但操作繁琐。
三、急性胃肠炎病毒—轮状病毒 1.生物学性状： 球形，核心含双链RNA，外被双层衣壳，内层核衣壳的壳粒呈放射状排列，电镜下犹如车轮状外形。 常用的细胞为原代猴肾细胞和传代猴肾细胞。 病毒抵抗力强，耐酸碱，耐乙醚。56℃30分钟可灭活。可被消毒剂灭活。 2.微生物检验 （1）标本采集与处理：发病早期采集腹泻粪便，密封送检。 （2）标本直接检查： 1）电镜和免疫电镜检查 2）抗原检测常用ELISA法、胶乳凝集试验 3）病毒RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳分析用于病毒分型 4）检测核酸 （3）分离培养 3.临床意义： 轮状病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病因。在发展中国家发病率高。 其发病和婴幼儿病死率仅次于呼吸道感染。 A组感染引起婴幼儿急性胃肠炎，感染以温带地区的秋冬季为主。 B组引起成人腹泻，无明显季节性。 四、黄病毒 一大群通过吸血的节肢动物而传播疾病的病毒。 （一）流行性乙型脑炎病毒 1.生物学性状： 基因组为单正链RNA。 结构蛋白有三种：M、C和E。M位于包膜内面，C在衣壳中，E是镶嵌在包膜上的糖蛋白，组成血凝素。 最易感染的动物为出生2～3天的乳鼠，经脑内接种后3～5天即可发病。在地鼠肾，幼猪肾等原代培养细胞内增殖，并引起明显的细胞病变。 抗原性稳定，很少变异。 2.微生物学检查 （1）标本直接检查： 免疫荧光技术及酶免疫技术进行病毒抗原检测。 PCR技术或核酸探针检测核酸。 （2）分离培养与鉴定： 接种乳鼠脑内，或原代金色地鼠肾细胞等培养细胞。 根据细胞病变、红细胞吸附试验证实病毒的增殖，阳性即可传代或鉴定。 （3）血清学诊断：可以利用血凝抑制、补体结合试验等进行血清学诊断。 3.临床意义： 猪为最重要的宿主和传染源。通过三带喙库蚊叮咬传播，引起流行性乙型脑炎。夏秋季节流行。 人感染后，绝大多数表现为隐性或轻型感染。只有少数发生脑炎。 病毒侵入脑组织内增殖，造成脑实质病变，表现为高热、惊厥或昏迷症状。 五、出血热病毒 （一）汉坦病毒 1.生物学性状： 圆形、椭圆形或多形性。单负股RNA，有长、中、短三片段。 在人肺传代细胞（A），非洲绿猴肾细胞（Vero-E6），人胚肺二倍体细胞（2BS）及地鼠肾细胞中增殖，不引起明显的细胞病变。 中和试验可将世界各地分离的汉坦病毒分成6个血清型。 对脂溶剂敏感，对酸抵抗力弱，60℃1小时可被灭活。 2.微生物学检查 （1）病毒分离与抗原检测： 常用Vero-E6细胞、A细胞分离病毒。 免疫荧光抗体染色检查细胞胞浆内的病毒抗原。 （2）血清学诊断： 免疫荧光染色，检查病人血清中的特异性IgM或IgG抗体。 ELISA检测特异性IgM适用于早期诊断。 3.临床意义： 引起肾综合征出血热（HFRS）。 侵入人体后约有2周的潜伏期，可引起流行性出血热，起病急，典型临床表现为高热、出血和肾损害。伴有三痛（头痛、眼眶痛、腰痛）及红（面、颈、上胸部潮红）。眼结膜、咽部及软腭充血。软腭、液下、前胸等处有出血点。 六、疱疹病毒 （一）单纯疱疹病毒（HSV） （二）水痘-带状疱疹病毒 （三）巨细胞病毒 （四）EB病毒 （一）单纯疱疹病毒（HSV） 1.生物学性状： 有包膜的DNA病毒，基因组由两个互相连接的长片段（L）和短片段（S）组成，为双股线状DNA。 在多种细胞内增殖，如原代兔肾、人胚肺、人胚肾细胞或地鼠肾细胞等。 细胞被感染后很快发生病变。如细胞肿胀、变圆、出现嗜酸性核内包涵体。 有两种血清型，HSV-1和HSV-2。 2.微生物学检查 （1）标本采集和处理； 采集水疱液、唾液、尿液、血液、脑脊液、阴道或宫颈拭子 标本应立即接种敏感细胞培养液，如果不能则将标本置于转运培养基，快速送检。 （2）直接检查病毒： 免疫电镜检查病毒颗粒或病变细胞。 姬姆萨染色，在光学显微镜下检查多核巨细胞和胞核内嗜酸性包涵体。 直接免疫荧光法或酶免疫法进行病毒抗原检测。 （3）分离及鉴定： 病毒分离培养是HSV感染实验室诊断的最敏感的方法，HSV-1和HSV-2在细胞培养中均可出现明显的细胞病变。 利用单克隆抗体进行确定HSV分离株的型别。 （4）分子生物学诊断；核酸杂交技术或PCR技术可检测出HSV。 （5）血清学诊断： ELISA或胶乳凝集试验可检测HSV抗体，但难以区分两型的感染。无助于早期诊断及指导抗病毒治疗。 3.临床意义： 通过直接密切接触和性接触传播，也可经飞沫及垂直传播。 HSV-1感染常局限在口咽部，通过唾液或呼吸道分泌物传播，引起口咽部疱疹、疱疹性角结膜炎、脑炎等。多见于半岁以后的婴幼儿，大多数呈隐性感染。 HSV-2的原发感染多见于青春期以后的患者，主要通过生殖道途径传播，主要表现为生殖器疱疹。 （二）水痘-带状疱疹病毒（VZV） 1.生物学性状： 与HSV相似，为线状双股DNA病毒。 只有一个血清型。 一般实验动物及鸡胚对VZV均不敏感。能在人胚二倍体肾细胞（HFDK）或人胚二倍体肺细胞（HFDL）培养中增殖。 受感染的细胞出现嗜酸性核内包涵体和多核巨细胞。 2.微生物学检查 （1）直接检测病毒或抗原： 直接或间接免疫荧光法检测病变细胞内的VZV抗原，有助于快速诊断。 免疫电镜检查，可对VZV感染进行特异性诊断。 核酸杂交或PCR技术亦可检出疱疹液中的VZV。 （2）病毒分离： 取水痘内容物（要求4天以内的内容物）接种人胚肾或人胚肺细胞。多数情况下3～7天可出现细胞病变效应。 （3）鉴定： 根据典型细胞病变效应进行初步鉴定； 利用标记的抗VZV的单克隆抗体进行直接荧光抗体染色，进行特异性鉴定。 （4）血清学诊断： EIA已成为VZV血清学诊断的主要方法。 3.临床意义： VZV可引起水痘和带状疱疹。 水痘为原发感染引起，主要发生于儿童，儿童初次感染VZV大约有两周的潜伏期，然后皮肤出现斑疹、水疱疹，可进一步发展为脓疱疹并伴有发热。 带状疱疹为复发感染所致，多发生于成人和老人。 （三）巨细胞病毒 1.生物学性状： 形态与基因组结构与HSV极为相似。 种属特异性高，即人CMV（HCMV）只能感染人。 只能在人成纤维细胞中才能增殖，增殖缓慢。 细胞病变特点为肿胀、核变大形成巨大细胞，核内有致密的嗜碱性包涵体，形似猫头鹰眼特征。 加热56℃30分钟，低pH、乙醚、紫外线、反复冻融均能使CMV灭活。 2.微生物检验 （1）标本采集：病毒分离可采取患者尿液、口腔拭子、外周血白细胞等。血清学诊断可采取患者血清。 （2）直接检查病毒： HE等染色观察巨大细胞和细胞核内的包涵体。 免疫荧光技术和酶免疫技术检查标本中的HCMV抗原。 核酸杂交或PCR技术检测HCMV的核酸。 3.临床意义 通过多种途径传播。 有先天性或获得性细胞免疫缺陷的儿童或成人，如艾滋病及器官移植患者，CMV感染很常见。 （1）正常人感染：常呈隐性感染，少数出现传染性单核细胞增多症。 （2）免疫功能缺损的个体的感染：致的间质性肺炎是骨髓移植受者的首位死因。AIDS患者HCMV感染以肺、中枢神经系统和胃肠道感染最为常见。 （3）先天性和围生期感染 1）先天感染：母体发生CMV感染，经胎盘传至胎儿引起宫内感染。 2）产时感染：与产道中的病毒相接触被感染。 3）产后感染：与排病毒的个体密切接触而获得。 （四）EB病毒 1.生物学性状 病毒颗粒为球形。 不能用常规的疱疹病毒培养方法进行培养。 一般用人脐血淋巴细胞或从外周血分离的B淋巴细胞培养。 根据病毒抗原表达时所处的病毒增殖周期的不同阶段，将EBV抗原分为3类： 1）潜伏期表达的抗原：EBV核抗原（EBNA）和潜伏期膜蛋白。 2）EBV增殖早期抗原（EA）。 3）病毒增殖晚期抗原：EBV衣壳抗原（VCA）及EBV包膜抗原（MA）。 （1）直接检查病毒： 抗补体免疫荧光法检查淋巴细胞或上皮细胞EB病毒核抗原。 核酸杂交和PCR或RT-PCR技术检测病毒。 （2）病毒分离培养及鉴定： 接种人脐带血淋巴细胞对EB病毒进行分离培养，孵育4周，病毒阳性培养物，通过抗补体免疫荧光法进行EB鉴定。 （3）血清学诊断： 嗜异性抗体检测可用于辅助诊断传染性单核细胞增多症。 进行针对病毒VCA、EA和EBNA的抗体测定，不同疾病患者的体内针对EBV不同的抗原成分所产生的抗体的组成及水平均有一定的特征性。 3.临床意义 流行广泛。主要通过唾液传播，也可因输血传染。 幼儿感染后多数无明显症状，但终生携带病毒，或引起轻度咽炎和上呼吸道感染。 青春期发生原发感染，约50%出现传染性单核细胞增多症。 EBV主要侵犯B细胞，与EB病毒感染有关的疾病主要有：传染性单核细胞增多症、非洲儿童恶性淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金病和其他某些淋巴瘤。
（一）甲型肝炎病毒 1.生物学性状 小RNA病毒科，无包膜，核心为单正股RNA。 只有一个血清型。 抵抗力较其他小RNA病毒强，60℃加热10～12小时后仍具有感染性，85℃加热立即灭活，对乙醚、氯仿及pH为3的酸性环境有抵抗力。 2.微生物检验 甲型肝炎患者病期不长，预后良好，一般不需进行病原学检查。 微生物检验以测定病毒抗原或抗体为主。 感染早期一般可用RIA或ELISA检测患者血清中抗-HAVIgM，是HAV新近感染的重要指标。了解既往感染史或进行流行病学调查，需检测抗-HAVIgG。 RT-PCR、核酸杂交技术直接检测抗原。 3.临床意义 主要通过粪一口传播，传染源多为人类，潜伏期15～50天，平均28天。 病毒常在患者ALT升高前5～6天就存在于患者的血清和粪便中，2～3周后，随血清特异性抗体的产生，血清和粪便的传染性逐渐消失。 甲型肝炎患者的粪便污染水源、食物以及某些海产品，可造成散发式大流行。
（2）抗原成分： 1）HBsAg是HBV感染的主要标志，由病毒DNA的S区编码。 2）HBcAg被HBsAg所覆盖，血中不易检出。由DNA的C区编码。HBcAg免疫原性强，抗-HBcIgG在血清中持续时间长，抗-HBcIgM提示HBV处于复制状态。 3）HBeAg为可溶性蛋白质，游离在血中，其消长与病毒体及DNA多聚酶的消长基本一致，故HBeAg已作为HBV复制及具有强感染性的一个指标。由病毒DNA的C区编码。 （3）抵抗力： 对理化因素有较强抵抗力。 60℃加热10小时，98℃加热1分钟，以及乙醚、pH为2.4的酸性环境处理6小时均不能有效灭活病毒。 2.微生物检验 （1）标本的采集与处理： 临床上常采集血液标本，HBV的血清标志物较稳定。 （2）检查方法： 主要靠RIA和ELISA等血清学方法检测HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBC.抗-HBe。其中HBsAg的检测最为重要，可发现无症状携带者，是献血者筛选的必检指标。 PCR检测HBVDNA也用于乙型肝炎的临床诊断。 3.临床意义 传染源是HBV携带者和患者的血液、唾液、精液和阴道分泌物。 传播途径大致可分为血液、血制品传播、性传播、母婴传播。通过破损的皮肤和黏膜侵入机体。 乙型肝炎临床表现呈多样性。 肝炎的症状可以是轻度而短暂的，也可以是重度和迁延性的。患者可以完全恢复健康。也可因暴发性肝炎而致死或成为慢性肝炎。部分HBV持续感染者可发生原发性肝癌。 （三）丙型肝炎病毒 1.生物学性状 小的有包膜的单正股RNA病毒。 可在黑猩猩体内传代。 尚不能用体外细胞培养进行分离。 抗原成分主要包括核衣壳蛋白，包膜蛋白及非结构蛋白。 对各种理化因素的抵抗力较弱。 2.微生物检验 目前临床上常用的HCV检测方法主要有两类： 血清学方法：测定抗-HCV。 ELISA法作为筛选试验条带免疫法作确认试验 PCR方法：检测HCVRNA。 3.临床意义 主要经输血或其他非肠道途径（如共用针头、血透析等）进行传播。 HCV的亚临床感染者是丙型肝炎的主要传染源。 根据临床病程可划分为急性和慢性，以6个月为区分界限。 HCV感染的一个主要特点就是慢性化的几率很高，感染过程很长，存在不同程度的肝组织病变,并呈慢性进行性。可发展为肝硬化，与原发性肝癌关系十分密切。 （四）丁型肝炎病毒 1.生物学特性 球形，外被HBsAg包绕，核心含HDV抗原（HDAg）和HDV-RNA基因组，基因组为一单负链环状RNA。 HDV不能独立复制，需要HBV辅助才能增殖。 对HDV敏感的动物有黑猩猩、东方土拨鼠等。 2.微生物检验 （1）HDAg检测：去除表面的HBsAg，然后用RIA或ELISA检测HDAg。 （2）HDVRNA检测：核酸杂交或RT-PCR技术对HDVRNA进行检测。 （3）抗-HDV抗体检测：HDV感染后2周左右产生抗-HDIgM，一个月达高峰，随后迅速下降，抗-HDIgG出现较迟，在恢复期出现。 丁型肝炎抗体不能清除病毒，如持续高效价，可作为慢性丁肝的指标。 利用ELISA等方法检测患者血清中抗-HDVIgM或抗-HDVIgG，通过检测抗-HBsIgM或IgG以及HBeAg和抗-HBe，作出同步感染和重叠感染的诊断。 3.临床意义 HDV可引起与HBV相关联的急性和慢性肝病。 HDV感染通常引起严重和进行性的肝病。 HDV传播方式主要是经血传播，也可通过密切接触与母婴间垂直传播。HDV感染只有在感染了HBV的人群或是与HBV同时侵入才能发生。重叠感染极易导致慢性化。 （五）戊型肝炎病毒 1.生物学特性 球型，无包膜，基因组为正单股RNA。 体外培养不易获得成功，敏感的实验动物为灵长目。特别是猕猴和黑猩猩。 对高盐、氯化铯、氯仿和反复冻融敏感。 2.微生物检验 可用电镜或免疫电镜技术检测患者粪便中的HEV颗粒。 PCR方法检测标本中HEVRNA。 临床常用的诊断方法是检测血清中的抗HEVIgM或IgG。 3.临床意义 主要经粪-口途径传播，患者多见于成人，未成年者大多为隐性感染。 戊型肝炎的潜伏期约为10～60天，潜伏期末和急性期初的患者粪便中病毒量较大，传染性最强，是戊型肝炎的主要传染源。 临床表现以黄疸为主多数患者发病6周即可好转并痊愈，不发展为慢性肝炎。 八、反转录病毒 带有以RNA为模板合成DNA的反转录酶。 人类免疫缺陷病毒 人类免疫缺陷病毒（HIV）在病毒分类学上属反转录病毒科慢病毒亚科慢病毒属。 已发现有HIV-1和HIV-2两型： HIV-1是引起全球艾滋病流行的病原体； HIV-2主要局限于西部非洲。
（4）病毒受体与细胞亲嗜性： HIV的主要靶细胞是CD4T淋巴细胞和单核-巨噬细胞亚群。皮肤的Langerhans细胞、淋巴结滤泡的树突状细胞、脑小胶质细胞等也是感染的对象。 CD4分子是HIV的主要受体，现已发现两种辅助受体CXCR4和CCR5。CXCR4是HIV的亲T细胞病毒株的辅助受体，CCR5是HIV的亲巨噬细胞病毒株的辅助受体。 （5）培养特性： 体外仅感染表面有CD4受体的T细胞、巨噬细胞。 实验室常用新鲜分离的正常人T细胞或病人自身分离的T细胞培养病毒。 （6）抵抗力： 病毒抵抗力较弱，56℃30分钟可灭活。可被消毒剂灭活。但在室温病毒活性可保持7天。 2.微生物检查 （1）病毒标志： 病毒培养：分离HIV。 分子生物学方法：检测HIVRNA。 （2）免疫标志：HIV抗原及抗体等免疫复合物。 1）抗原检测：常用间接ELISA法检测p24抗原。 2）抗体检测：抗p24及其前体p55的抗体在血清中出现最早，随后出现抗gp／的抗体，是初期感染的最稳定的指标。抗p41的抗体常在p24抗体出现后数周才出现。 ①初筛试验：EIA.IFA.凝集试验等。 ②确证试验：免疫印迹实验（Westernbolt，WB）、放射免疫沉淀试验。 3）相关标志： 与艾滋病病情发展或HIV感染密切相关而存在于体内的某些生化或化学物质。如CD4细胞、新蝶呤、白细胞介素等。 3.临床意义 HIV是获得性免疫缺陷综合征（AIDS，艾滋病）的病原体。 AIDS是以侵犯CD4细胞为主，造成细胞免疫功能缺陷，并继发体液免疫功能缺损为基本特征的传染病。 传染源是HIV无症状携带者和艾滋病患者。 传播途径主要有：性接触传播、血液传播、母婴传播。 临床病程分为4个时期，即急性感染期、无症状感染期、艾滋病相关综合征、艾滋病（艾滋病完全型）。 HIV的致病机制： HIV直接损伤或间接损伤CD4T细胞； HIV抑制抗原递呈细胞功能； HIV诱发自身免疫性疾病及诱导细胞凋亡； HIV导致CD8T细胞丧失抗病毒活性等。 机体感染HIV后可产生多种抗体，病毒也可刺激机体产生细胞免疫应答，但依然无法清除病毒，这与病毒能逃逸免疫作用有关。 九、狂犬病病毒 （一）生物学性状 外形似子弹状，病毒体内含单负股RNA，外面是脂蛋白包膜，其表面有许多糖蛋白刺突，与病毒的感染性和毒力有关。 一种嗜神经性病毒。 该病毒可感染的动物范围较广。 在易感动物或人类的中枢神经细胞中增殖时，在胞质内形成嗜酸性包涵体，称内基小体，在诊断上很有价值。 （二）微生物检验 1.隔离观察动物 若7～10天不发病，一般认为该动物没有患狂犬病或咬人时唾液中尚无狂犬病病毒。 2.印片、切片检查 取带病毒动物海马回部组织作切片或涂片， HE染色检查内基小体； 直接荧光抗体法（DFA）或ELISA法检测病毒抗原。 3.细胞培养 接种敏感细胞，培养40～48小时后，用DFA进行病毒抗原检测，如果阴性进行第二代培养，经3～4天，再用DFA检查是否有病毒生长，如果二次培养均阴性，则最终视为阴性。 4.血清学诊断 中和试验、补体结合试验、血凝抑制试验、ELISA试验等。 5.分子生物学 RT-PCR技术检测标本中狂犬病毒RNA，此方法敏感、快速、特异。 （三）临床意义 人类狂犬病大多数是由病犬咬伤所致，有时也可因猫、狼以及其他带菌动物咬伤所致。 典型临床表现是神经兴奋性增高，吞咽或饮水时喉头肌痉挛，甚至闻水声或其他轻微刺激包括光线均可引起全身痉挛发作，又称恐水病。发病3～5天后患者转入麻痹期,最后因昏迷、呼吸循环衰竭而死亡。 死亡率几乎达%。 十、人乳头瘤病毒 （一）生物学性状 由病毒衣壳和双链环状DNA组成。 具有宿主和组织特异性，只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞。 易感细胞核内增殖形成核内嗜酸性包涵体。 目前HPV组织培养尚未成功。 （二）微生物检验 临床常根据病史及典型的临床表现即可作出诊断。 症状不典型： 病理学检查或用免疫组化技术等方法检查病变组织中的HPV抗原。 分子生物学诊断方法有：核酸分析、原位杂交、DNA印迹、PCR。 （三）临床意义 HPV可通过性接触感染，引起尖锐湿疣。也可经产道感染。 病毒感染仅局限于局部皮肤和黏膜中，引起该部位多种疣，不产生病毒血症。 尖锐湿疣主要由HPV-6引起，也可由1、2等型引起。 HPV-16、18、31、33等型别可引起宫颈内瘤样变，组织学变化可由宫颈上皮的不典型增生至原位癌，严重者可发展为浸润癌。
本章小结：
一、病毒的生物学性状 二、病毒的实验室检查方法 三、常见病毒的感染
小试牛刀
一、A1
1、下列哪一点为病毒与其他微生物（细菌、立克次体和衣原体等）的明显不同（ ）。
A、病毒不含氨基糖酸
B、病毒不含氨基酸
C、病毒不含核酸
D、病毒含氨基糖酸
E、病毒只含核酸
A
病毒仅含一种核酸作为遗传物质，外被蛋白质衣壳或还有包膜。病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。基本结构是指病毒的核心和衣壳两部分。病毒的核心充满一种类型的核酸，即DNA或RNA，构成病毒的基因组。此外，核心还含有少数功能蛋白，主要是病毒早期复制所需的一些酶。病毒的衣壳是包围在核酸外的一层蛋白质，由一定数量的壳粒聚合而成。衣壳可保护核酸免受核酸酶及其他理化因素的破坏。
2、下列哪种细胞适合于乙脑病毒的分离和培养（ ）。
A、C6/36细胞
B、鸡胚细胞
C、鸭胚细胞
D、Hela细胞
E、CER细胞
A
乙脑病毒的分离和培养：BHK细胞系、C6/36细胞系及鸡胚成纤维细胞是常用的敏感细胞，病毒在细胞内增殖引起细胞圆缩、颗粒增多、细胞脱落等CPE。在培养上清中含有传染性病毒，胞浆内胞膜上可检出特异性抗原。细胞培养增殖病毒简便易行，已取代动物培养用物制备疫苗、诊断抗原，以及研究病毒复制机理、筛选抗病毒药物等。
3、检测到下列哪种抗体可确诊病毒引起的新生儿先天性感染（ ）。
A、IgG
B、IgM
C、IgA
D、IgD
E、IgE
B
IgM抗体可确诊病毒引起的新生儿先天性感染，如患儿出生时血清中有抗风疹病毒IgM抗体和从母体获得的IgG抗体，或宫内羊水中有IgM抗体可判定为先天性风疹综合征。
4、HBsAg（-）、抗-HBs（+）、HBeAg（-）、抗HBe（-）、抗HBc（-），表明（ ）。
A、急生肝炎初期
B、慢性活动性肝炎
C、乙肝恢复并产生免疫力
D、既往乙肝病毒感染
E、慢性迁延性肝炎
C
HBsAg为乙型肝炎病毒的小球形颗粒，抗-HBs（+）说明既往感染过乙肝病毒。
5、埃博拉病毒致病性的差异主要取决于（ ）。
A、血清型的不同
B、病毒科的不同
C、被感染者不同
D、性别不同
E、人种不同
A
EBV属丝状病毒科丝状病毒属，为单股负链RNA，根据病毒抗原不同分为4个亚型，即埃博拉－扎伊尔、埃博拉－苏丹、埃博拉－莱斯顿及埃博拉－科特。不同亚型EBV的毒力不同，扎伊尔亚型毒力最强，引起人类感染且病死率最高，苏丹亚型次之，莱斯顿亚型仅在非人类灵长类中引起发病和死亡，尚未见引起人类致病的报告。
6、不能用于检查病毒的方法是（ ）。
A、动物接种
B、鸡胚尿囊接种
C、鸡胚卵黄囊接种
D、细胞培养
E、人工培养基培养
E
病毒标本的分离培养方法包括：（1）组织培养：器官培养、组织块培养和细胞培养。（2）鸡胚接种：鸡胚卵黄囊接种、羊膜腔和尿囊腔接种。（3）动物接种：用新生小鼠或乳鼠进行病毒分离。
7、出血热病毒属于下列哪一种基因类型的病毒（ ）。
A、负链RNA
B、正链RNA
C、分节段
D、不分节段
E、双链RNA
A
生物学性状病毒呈圆形、椭圆形或多形性。核酸类型为单负股RNA，有长、中、短三个片段。
8、噬菌体的核酸，最常见的是（ ）。
A、双链环状DNA
B、双链线状DNA
C、单链环状DNA
D、单链线状NA
E、单链RNA
B
大多数噬菌体的DNA为线状双链，但一些微小噬菌体的DNA为环状单链。有尾噬菌体的核酸均为线状双链DNA，无尾噬菌体的核酸可为环状单链DNA或线状单链DNA。
9、呼吸道合胞病毒因在组织培养繁殖时能引起下列哪一种现象而定为现在的名称（ ）。
A、细胞聚合
B、细胞融合
C、细胞核消失
D、细胞界限不清
E、细胞破裂
B
呼吸道合胞病毒属副粘病毒科、肺病毒亚科、肺病毒属。电镜负染色呈球形，单个病毒颗粒具有多形性。核酸为单负股RNA，不分节段。包膜上的G蛋白作用于类似于流感病毒的血凝素蛋白HA，包膜上的F蛋白是融合蛋白，介导病毒穿入和细胞融合。
10、下列哪种病毒不属于肝炎病毒（ ）。
A、HCV
B、HBV
C、HEV
D、HAV
E、CMV
E
巨细胞病毒（CMV）的形态与基因组结构与HSV极为相似，但病毒感染的宿主范围及细胞范围均狭窄，且种属特异性高，即人EMV（HCMV）只能感染人。体外培养HCMV只能在人成纤维细胞中才能增殖。CMV可存在唾液、尿、乳汁、泪液、粪便、阴道或宫颈分泌物、血液、精液中，因此病毒可通过多种途径传播。
11、对甲型肝炎早期有诊断价值的免疫球蛋白是（ ）。
A、IgA
B、IgG
C、IgM
D、IgE
E、IgD
C
甲型肝炎病毒的微生物学检查以测定病毒抗原或抗体为主。感染早期一般可用RIA或ELISA检测病人血清中抗-HAVIgM。它是HAV新近感染的重要指标，出现早，消失快。对于了解既往感染史或进行流行病学调查，需检测抗-HAVIgG。也可利用ELISA或EIA、RT-PCR、核酸杂交技术直接检测抗原。
12、登革休克综合征主要诊断依据不包括（ ）。
A、出血
B、休克
C、肾脏损伤
D、口唇发绀
E、肌肉关节酸痛
C
病毒感染人体后，可在毛细血管内皮细胞和单核细胞中增殖，然后经血液播散，引起发热、口唇发绀、肌肉关节酸痛、淋巴结肿胀及皮肤出血、休克等。
13、脊髓灰质炎病毒主要经过下列（ ）途径传播。
A、人畜途径
B、血液途径
C、破损皮肤
D、粪-口途径
E、性传播
D
脊髓灰质炎病毒属于肠道病毒，是小RNA病毒科肠道病毒属。由粪-口途径传播。
14、HIV造成免疫系统的多种功能发生缺陷的主要原因是下列哪一点（ ）。
A、血管内皮细胞耗竭
B、CD4T细胞耗竭
C、红细胞耗竭
D、间质细胞耗竭
E、肥大细胞耗竭
B
HIV的致病机制主要有以下几种观点：HIV直接损伤或间接损伤CD4T细胞；HIV抑制抗原呈递细胞功能；HIV诱发自身免疫性疾病及诱导细胞凋亡；I-IIV导致CD82、细胞丧失抗病毒活性等。
15、WHO推荐下列哪一种方法取代传统的小鼠中和实验检测狂犬疫苗免疫后中和抗体水平（ ）。
A、直接荧光抗体法试验
B、空斑试验
C、血清中和试验
D、动物保护试验
E、空斑抑制试验
A
狂犬疫苗的微生物学检查：人被犬和其他动物咬伤后，将该动物隔离观察，若以上隔离动物在观察期间发病，即将其杀死，取海马回部组织作切片或涂片，用直接荧光抗体法（DFA）检测病毒抗原。
16、乙肝病毒的“两对半”结果中，最具传染性的患者（ ）。
A、HBsAg（－）、抗HBs（－）、HBeAg（－）、抗HBe（－）、抗HBc（－）
B、HBsAg（＋）、抗：HBs（－）、HBeAg（－）、抗HBe（－）、抗：HBc（－）
C、HBsAg（＋）、抗HBs（－）、HBeAg（－）抗HBe（＋）抗HBc（＋）
D、HBsAg（＋）、抗HBs（－）、HBeAg（＋）、抗HBe（－）、抗HBc（＋）
E、HBsAg（－）、抗HBs（－）、HBeAg（－）、抗IlBe（－）、抗HBc（＋）
D
临床实验室目前主要靠RIA和ELISA等血清学方法检测HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe。其中HBsAg的检测最为重要。①HBsAg是HBV感染的主要标志；②抗-HBcIgM提示HBV处于复制状态；③HBeAg作为HBV复制及具有强感染性的一个指标。
17、流行性出血热的病原属于下列哪一个科的病毒（ ）。
A、弹状病毒科
B、披膜病毒科
C、冠状病毒科
D、腺病毒科
E、布尼亚病毒科
E
汉坦病毒属于动物病毒或虫媒病毒中的布尼亚病毒科，汉坦病毒属。临床上常引发流行性出血热。
18、乙型肝炎患者血液中有种特有的抗原是（ ）。
A、HBcAg
B、HBeAg
C、HBsAg
D、HBcIG
E、HBcIgM
C
HBsAg的检测最为重要，可发现无症状携带者，是献血员筛选的必检指标。乙型肝炎患者血液中有种特有的抗原是HBsAg。
19、血清中检HBsAg通常不可见于（ ）
A、急性乙型肝炎潜伏期或急性期
B、HBsAg携带者
C、慢性迁延型肝炎或慢性活动型肝炎
D、肝炎后肝硬化或肝癌
E、已产生HBsAg的人
E
HBsAg是机体感染乙型肝炎病毒（HBV）的标志，也是机体血清中首先出现的病毒标志物。HBsAg阳性可见于急性乙肝患者的潜伏期、急性期，慢性乙肝，无症状携带者，慢性活动型肝炎以及肝炎后肝硬化或肝癌等。
20、抗HDV抗体检测可以反应下列哪一种状况（ ）。
A、是否有HDV血症
B、HDV感染状况
C、HDV复制状况
D、HDV感染时间
E、HDV已经消退
B
通过检测HDV感染的血清学标志物以及HDVRNA，结合HBV感染的检测，可作出HDV感染的实验室诊断。
21、下列哪项不符合人乳头瘤病毒感染的变化（ ）。
A、是婴幼儿的致命性疾病
B、上皮细胞体积明显增大
C、胞核内为嗜酸性包涵体
D、偶见包涵体与核边之间有狭窄空晕
E、电镜下，病毒颗粒无膜，呈结晶状排列
A
人乳头瘤病毒具有宿主和组织特异性，只能感染人的皮肤、黏膜的上皮细胞，在易感细胞核内增殖形成核内嗜酸性包涵体，婴幼儿可在分娩的过程中感染，或与母亲密切接触而感染，但病毒感染仅局限于皮肤和黏膜，引起该部位多种疣，不产生病毒血症。
22、在我国，新疆出血热的传播媒介主要为（ ）。
A、虱子
B、跳蚤
C、蚊子
D、螨
E、硬蜱
E
新疆出血热，属一种自然疫源性疾病，流行于有硬蜱活动的荒漠牧场。野生啮齿动物及家畜是主要储存宿主，硬蜱是该病毒的传播媒介，亦是储存宿主，潜伏期2～10天，大多数感染者突然发热，表现为发热，全身肌肉痛，中毒症状和出血。
23、流行性出血热双价苗是指下列哪一种疫苗（ ）。
A、灭活和非灭活混合疫苗
B、两种细胞混合培养疫苗
C、两种组织混合培养疫苗
D、两种疫苗合并应用
E、家鼠型和野鼠型混合疫苗
E
目前应用的流行性出血热灭活疫苗有单价、双价两种，其中双价苗是指家鼠型和野鼠型混合疫苗。
24、血清中HBVDNA聚合酶的存在，表明HBV的感染处于下列哪一时期（ ）。
A、病毒血症期
B、病毒活动复制期
C、病毒血症前期
D、病毒血症后期
E、病毒血消退期
B
HBsAg的检测最为重要，可发现无症状携带者，是献血员筛选的必检指标。近年来，PCR检测HBVDNA也用于乙肝的临床诊断。所以，血清中存在HBVDNA聚合酶，表明HBV的感染处于病毒活动复制期。
25、下列哪项检查结果，对乙型肝炎的早期诊断最有价值（ ）。
A、AST升高，A/G比值倒置
B、ALT升高，HBsAg（+），抗-HBCIgM（+）
C、HBsAg（+），HBeAg（-），抗HBC（+）
D、HBsAg（+），抗HBe（+），抗HBc（+）
E、抗HBe（+），抗HBc（-）
B
临床实验室目前主要靠RIA和ELISA等血清学方法检测HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe。其中HBsAg的检测最为重要。HBsAg是HBV感染的主要标志，抗-HBcIgM提示HBV处于复制状态。HBeAg作为HBV复制及具有强感染性的一个指标。由此可知，HBsAg（+），抗-HBCIgM（+）可以作为乙型肝炎的早期诊断，同时ALT升高。
26、Vero细胞是下列哪一种细胞（ ）。
A、人二倍体细胞
B、原代地鼠肾细胞
C、中国地鼠卵巢细胞
D、原代鸡胚细胞
E、非洲绿猴肾细胞
E
Vero-E6细胞就是非洲绿猴肾细胞。
27、噬菌体在医学和生物学中有重要意义，其主要应用没有（ ）。
A、噬菌体分离与测定
B、检测标本中的未知细菌
C、细菌的鉴定与分型
D、分子生物学的重要实验工具
E、是人体的正常菌群
E
除以动、植物细胞为宿主的病毒外，还有以细菌、真菌等为宿主的病毒，这些侵袭细菌等并在其中增殖，能引起细菌等裂解的病毒称噬菌体。噬菌体具有识别细菌表面特异受体的功能，这种特异性是极为严格的，可用于进行细菌的鉴定与分型。是分子生物学的重要实验工具。
28、从自然界动物或病人中发现的狂犬病毒称为（ ）。
A、固定毒
B、野毒株或街毒株
C、病毒原型
D、减毒株
E、强毒株
B
从自然界动物体内新分离出的病毒株称为野毒株或街毒株。
29、埃博拉病毒属于下列哪一科的病毒（ ）。
A、弹状病毒科
B、丝状病毒科
C、正粘病毒科
D、副粘病毒科
E、腺病毒科
B
丝状病毒科只有一个属，即丝状病毒属。它包括两种病毒，即马尔堡病毒（MBV)和埃博拉病毒（EBV)。
30、亚病毒指如下哪种病原体（ ）。
A、RNA病毒
B、DNA病毒
C、包膜病毒
D、类病毒
E、衣原体
D
非寻常病毒是比病毒更小更简单的致病因子，又称为亚病毒因子，包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。
31、某患者ALT显著升高，AST轻度升高，HBsAg（+），HBeAg（+），抗HBC（+），抗HAV-IgG（+），应考虑为（ ）。
A、急性甲型肝炎HBsAg携带者
B、急性甲型肝炎合并急性乙型肝炎
C、急性乙型肝炎并感染过甲型肝炎病毒
D、非甲非乙型肝炎
E、非甲非乙型肝炎，HBsAg携带
C
关于乙型肝炎：HBsAg是HBV感染的主要标志，抗-HBcIgM提示HBV处于复制状态。HBeAg作为HBV复制及具有强感染性的一个指标。HAV-IgG（+）提示患有甲型肝炎。同时ALT显著升高，AST轻度升高。由此可知，该患者患的是急性乙型肝炎并感染甲型肝炎病毒。
32、测定HIV感染的最简便方法是（ ）。
A、测定HIV抗体
B、分离HIV病毒
C、测定HIV抗原
D、测定HIV核酸
E、HIV基因测序
A
抗核心蛋白p24及其前体p55的抗体在血清中出现最早，随后出现抗包膜糖蛋白gp/的抗体。这些被认为是初期感染的最稳定的指标。抗糖蛋白p41的抗体常在p24抗体出现后数周才出现。
33、HBV的垂直传播途径为（ ）。
A、呼吸道吸入
B、蚊子
C、胎盘
D、皮肤损伤
E、粪-口
C
乙型肝炎病毒（HBV）可致乙型肝炎。病毒可通过破损的皮肤和黏膜侵入机体，传染源是HBV携带者和患者的血液、唾液、精液和阴道分泌物等。HBV的传播途径大致可分为血液、血制品传播、性传播、母婴传播。其中经胎盘的母婴传播方式为垂直传播。
34、狂犬病毒街毒株经过系列传代适应特定宿主后可称之为（ ）。
A、固定株
B、野毒株或街毒株
C、病毒原型
D、减毒株
E、强毒株
A
从自然界动物体内新分离出的病毒株称为野毒株或街毒株；将街毒株连续在家免脑内传代约50次后获得的人工变异株称为固定株，其特点是潜伏期短，致病力大大减弱，可用来制备减毒活疫苗，预防狂犬病。
35、患者HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗-Hbe（-）、抗-HBc（+）、抗-HBs（-），正确的判断是（ ）。
A、患急性乙型肝炎
B、患慢性乙型肝炎
C、患慢性迁延性肝炎
D、乙肝恢复期
E、患慢性活动性肝炎
A
乙型肝炎的检查分别为：①乙肝表面抗原（HBsAg）；②乙肝表面抗体（抗-HBs）；③e抗原（HBeAg）；④e抗体（抗-HBe）；⑤核心抗体（抗-HBc）。如果第①③⑤项阳性，为急性期感染。第①④⑤项阳性，多为慢性期感染。此题的患者应为急性乙型肝炎。
36、根据埃博拉病毒的抗原性差异，又可将埃博拉病毒分为（ ）个亚型。
A、1
B、2
C、3
D、4
E、5
D
EBV属丝状病毒科丝状病毒属，为单股负链RNA，根据病毒抗原不同分为4个亚型，即埃博拉－扎伊尔、埃博拉－苏丹、埃博拉－莱斯顿及埃博拉－科特。不同亚型EBV的毒力不同，扎伊尔亚型毒力最强，引起人类感染且病死率最高，苏丹亚型次之，莱斯顿亚型仅在非人类灵长类中引起发病和死亡，尚未见引起人类致病的报告
37、流行性腮腺炎最具有流行病学意义的传染源是下列哪一种（ ）。
A、亚临床型者
B、疾病时期
C、疾病早期
D、疾病晚期
E、疾病恢复期
A
流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒引起的急性、全身性感染，多见于儿童及青少年。以腮腺肿大、疼痛为主要临床特征，约20%～40%腮腺炎患者无腮腺肿大，这种亚临床型的存在，造成诊断、预防和隔离方面的困难。本病病毒通过直接接触、飞沫、唾液污染食具和玩具等途径传播；四季都可流行，以晚冬、早春多见。所以亚临床型者就成为了主要的传染源。
38、在目前流行的多种类型肝炎中，可以用接种疫苗的方法进行感染前的预防的型号为（ ）。
A、HAV
B、HBV
C、HCV
D、HDV
E、HEV
B
乙型肝炎病毒（HBV）是一种嗜肝脱氧核糖核酸病毒，它属于一种复合体DNA病毒，可以用接种疫苗的方法进行感染前的预防。
39、流感病毒易发生抗原变异的主要原因是（ ）。
A、流感病毒核蛋白变异性很强
B、流感病毒血凝素变异性很强
C、流感病毒基质蛋白变异性很强
D、流感病毒聚合酶变异性很强
E、流感病毒非结构蛋白变异性很强
B
流感病毒的包膜：位于M蛋白外面的脂质双层，含有宿主细胞膜成分，其中镶嵌有突出于病毒表面的两种结构蛋白，一种为血凝素（HA），另一种为神经氨酸酶（NA）。流感病毒易发生变异，变异的物质基础是HA和NA，两者变异可同时出现，也可单独出现。抗原变异幅度小时称为抗原漂移，如果变异幅度大形成新的亚型，一般引起大规模流行，这称为抗原转变。
40、甲型肝炎是由甲肝病毒引起的，在病毒分类上甲肝病毒属于下列哪一科的病毒（ ）。
A、DNA病毒科
B、微小DNA病毒科
C、微小RNA病毒科
D、小RNA病毒科
E、逆转录病毒科
D
甲型肝炎病毒（HAV）属小RNA病毒科，无包膜，核心为单正股RNA。
41、类病毒只是单链共价闭合的RNA分子，没有外壳蛋白，依据如下哪一个特性可以判断其没有脂外膜（ ）
A、耐酸
B、耐碱
C、耐腐蚀
D、对有机溶剂有抵抗力
E、对RNA酶有抵抗力
D
类病毒是目前已知最小的可传染的致病因子，比普通病毒简单。类病毒是无蛋白质外壳保护的游离的共价闭合环状单链RNA分子，侵入宿主细胞后自我复制，并使宿主致病或死亡。类病毒能耐受紫外线和作用于蛋白质的各种理化因素，比如对蛋白酶，胰蛋白酶，尿素等都不敏感（“真病毒”均敏感），在90℃下仍能存活（“真病毒”在50～60℃下失活）。对酚等有机溶剂不敏感。
42、衣原体与病毒的相同点是（ ）。
A、繁殖方式
B、细胞内寄生
C、细胞结构
D、核酸类型
E、抗生素敏感性
B
衣原体是一群体积较小，能通过细菌滤器，细胞内专性寄生，并有独特发育周期的原核细胞型微生物。病毒是一类非细胞型微生物，个体极小，可通过细菌滤器，需用电子显微镜观察。仅含一种核酸作为遗传物质，外被蛋白质衣壳或还有包膜。病毒只能在活细胞内寄生，以复制的方式进行增殖。两者的共同点是细胞内寄生。
43、下列哪种方法是病毒感染的实验室检查中的“金标准”（ ）。
A、ELISA
B、病毒分离培养
C、免疫荧光
D、PCR
E、核酸分子杂交
B
目前，病毒的分离、培养与鉴定最常采用的仍是细胞培养法，其准确性高，是确定病原的“金标准”。
44、引起传染性单核细胞增多症的病毒是（ ）。
A、Ⅰ型单纯疱疹病毒
B、Ⅱ型单纯疱疹病毒
C、CMV
D、EB病毒
E、呼吸道合胞病毒
D
与EB病毒感染有关的疾病主要有：传染性单核细胞增多症、非洲儿童恶性淋巴瘤、鼻咽癌、霍奇金病和其他某些淋巴瘤。
45、朊病毒的主要成分是（ ）。
A、蛋白质
B、壳膜
C、包膜
D、RNA
E、DNA
A
非寻常病毒是比病毒更小更简单的致病因子，又称为亚病毒因子，包括类病毒、卫星病毒和朊粒等。朊粒即朊病毒，个体微小，不含核酸，其主要成分是一种蛋白酶抗性蛋白，对各种理化作用的抵抗力强，具有传染性，是引起传染性海绵状脑病的病原体。朊粒至中枢神经系统退化性病变，引起牛海绵状脑病，俗称疯牛病。
46、A群轮状病毒具有下列哪一个共同特点（ ）。
A、相同的毒力
B、相同的形态
C、相同的集落
D、相同的群抗原
E、相同的致病力
D
轮状病毒呈球形，核心含双链RNA，外被双层衣壳，内层核衣壳的壳粒呈放射状排列，电镜下犹如车轮状外形。常用的细胞为原代猴肾细胞和传代猴肾细胞。病毒抵抗力强，耐酸碱，耐乙醚。56℃30分钟可灭活。可被消毒剂灭活。A群轮状病毒的共同特点是具有相同的群抗原。轮状病毒属肠道病毒是引起婴幼儿急性腹泻的主要病因。
47、流行性腮腺炎是由下列哪一个科的病毒引起的（ ）。
A、弹状病毒科
B、布尼亚病毒科
C、副粘病毒科
D、正粘病毒科
E、腺病毒科
C
流行性腮腺炎是由腮腺炎病毒引起的急性、全身性感染。腮腺炎病毒属副粘病毒科。病毒呈球形，包膜上有神经氨酸酶、血凝素及具有细胞融合作用的F蛋白。该病毒仅有一个血清型，因与副流感病毒有共同抗原，故有轻度交叉反应。
二、A2
1、患者，男性，40岁。恶心，呕吐2天。1天前上腹部开始疼痛，食物的气味可诱发恶心，尿颜色变深。该患者是一名服务员，嗜烟，嗜酒，在近3个月内有4个性伙伴，无输血或静脉滥用药史。眼球巩膜黄染，肝大肋下px。血清学检查结果：抗HAVIgM（-），HBsAg（+），抗HBcIgM（+），抗-HBS（-）。则该患者为下述哪种情况（ ）。
A、急性期已开始恢复
B、急性期传染性强
C、感染过HBV，已开始恢复
D、感染过HBV，已产生免疫力
E、急性期体内有病毒复制
B
乙型肝炎病毒是通过破损的皮肤和黏膜侵入机体，传染源是HBV携带者和患者的血液、唾液、精液和阴道分泌物等。HBV的传播途径大致可分为血液、血制品传播、性传播、母婴传播。乙型肝炎临床表现呈多样性。在多数急性感染病人中，肝炎症状不明显，既无症状，也无黄疸。有一些病人有症状但无黄疸，还有一些病人既有黄疸又有症状。HBsAg是HBV感染的主要标志，HB-cAg免疫原性强，抗-HBcIgG在血清中持续时间长，抗-HBcIgM提示HBV处于复制状态。通过对患者HBV血清标志物的检查可知，该患者正处于HBV急性期，传染性强。
2、20岁男性，喜食毛蚶，一周前突然发病，有畏寒，发热，全身乏力，食欲下降，厌油腻，肝区疼痛，尿色渐加深至浓茶状。近日体温降低，巩膜和皮肤出现黄疸，最可能的印象诊断是（ ）。
A、甲型肝炎
B、乙型肝炎
C、丙型肝炎
D、丁型肝炎
E、戊型肝炎
A
甲型肝炎病原体寄居于水产品，甲肝发病急，有畏寒，发热，全身乏力，食欲不振，厌油腻，肝区疼痛，尿色渐加深至浓茶状。
3、一名4岁幼儿发热，持续性咳嗽10余天，经物诊和X线片检查临床诊断为病毒性支气管肺炎。在下列病毒中，不可能引起本病的病毒是（ ）。
A、呼吸道合胞病毒
B、流感病毒
C、轮状病毒
D、副流感病毒
E、腺病毒
C
除轮状病毒外，其他病毒均可引起肺炎，轮状病毒主要引起小儿腹泻。
4、可用于鉴定细菌、细菌分型、并与细菌毒力有关的病毒是（ ）。
A、细菌
B、真菌
C、病毒
D、噬菌体
E、衣原体
D
噬菌体可用于鉴定细菌、细菌分型，并与细菌毒力有关。
5、从1岁婴幼儿腹泻便中，找到一球形病毒，核心含双链RNA，外被双层衣壳，内层核衣壳的壳粒呈放射状排列，电镜下如车轮外形，它可能是（ ）。
A、腺病毒
B、轮状病毒
C、麻疹病毒
D、脊髓灰质炎病毒
E、埃可病毒
B
轮状病毒为球形，核心含双链RNA，外被双层衣壳，内层核衣壳的壳粒呈放射状排列，电镜下如车轮外形多引起2岁以下婴幼儿腹泻。
6、某病原体能在细胞和鸡胚培养，能形成包涵体，可通过滤器，对抗生素不敏感，含一种核酸，它是（ ）。
A、衣原体
B、支原体
C、螺旋体
D、病毒
E、真菌
D
病毒能在细胞和鸡胚培养，能形成包涵体，可通过滤器，对抗生素不敏感，含一种核酸。
7、可保护病毒核酸、具有抗原性并能介入核酸进入宿主细胞的是病毒的（ ）。
A、包膜
B、核酸
C、衣壳
D、刺突
E、糖蛋白
C
衣壳可保护病毒核酸、具有抗原性并能介入核酸进入宿主细胞。
三、B
1、A.吸附B.穿入C.脱壳D.组装E.释放
1、病毒核酸被包入病毒衣壳而形成核衣壳的过程为（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
D
病毒核酸被包入病毒衣壳而形成核衣壳的过程为组装，此时病毒细胞已经成熟。
2、A.HIV的env基因B.HIV的pol基因C.HIV的gag基因D.HIV的LTR基因E.HIV的tat基因
1、编码HIV的gP包膜蛋白（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
A
env基因编码合成两种包膜糖蛋白gpl20和gp41。
2、对病毒基因组转录的调控起作用的长末端重复序列（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
D
基因组从5’至3’端依次排列为LTR、gag、pol、env、LTR，即重复的基因是LTR。
3、编码HIV的逆转录酶（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
B
HIV由两条拷贝的单股正链RNA在5’端通过氢键结合而形成的二聚体。基因组从5’至3’端依次排列为LTR、gag、pol、env、LTR，还有6个调节基因，即tat、rev、nef、vif、vpr、vpu/vpx。gag基因编码病毒的核心蛋白，其中衣壳蛋白p24特异性最强。pol基因编码病毒复制所需的酶类。
3、A.波状热B.Q热C.登革热D.风湿热E.回归热
1、回归热螺旋体引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
E
回归热是一种由节肢动物传播的、有周期性反复发作的急性传染病。引起该病的疏螺旋体有两种：回归热螺旋体，以虱为传播媒介，引起流行性回归热；赫姆疏螺旋体，以蜱为传播为媒介，引起地方性回归热。
2、登革热立克次体引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
C
登革病毒储存于人和猴，通过埃及伊蚊和白纹伊蚊等传播。病毒感染人体后，可在毛细血管内皮细胞和单核细胞中增殖，然后经血液播散，引起发热、肌肉和关节酸痛、淋巴结肿胀及皮肤出血、休克等。临床上分为普通型登革热和登革出血热/登革休克综合征两个类型。前者病情较轻，后者病情较重。
3、Q热柯克斯体引起（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
B
贝纳柯克斯体（又称Q热立克次体）以蜱为传播媒介，也可不借助于媒介节肢动物而通过接触、呼吸道、消化道等途径传给人，引起Q热。
4、A.HIV的env基因B.HIV的pol基因C.HIV的gag基因D.HIV的LTR基因E.HIV的tat基因
1、编码HIV的衣壳蛋白P24（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
C
HIV由两条拷贝的单股正链RNA在5’端通过氢键结合而形成的二聚体。基因组从5’至3’端依次排列为LTR、gag、pol、env、LTR，还有6个调节基因，即tat、rev、nef、vif、vpr、vpu/vpx。gag基因编码病毒的核心蛋白，其中衣壳蛋白p24特异性最强。pol基因编码病毒复制所需的酶类。
5、A.吸附B.穿入C.脱壳D.组装E.释放
1、病毒感染宿主细胞的最早阶段为（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
A
病毒必须依赖宿主细胞，以特殊的自我复制方式进行增殖。病毒最早是通过吸附作用来达到感染宿主细胞的目的。
2、病毒可通过崩解宿主细胞或出芽方式完成的过程称为（ ）。
A、
B、
C、
D、
E、
E
病毒必须依赖宿主细胞，以特殊的自我复制方式进行增殖。病毒的复制周期一般可分为吸附、穿入、脱壳、生物合成、组装与成熟、释放等6个阶段。病毒可通过崩解宿主细胞或出芽方式完成的过程称为释放。
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